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其它试剂抗体的制备

免疫检测是基于抗原和抗体的特异性反应而进行检测的方法。通过将易检测而又高度敏感的物质标记特异性抗原或抗体分子,通过标记物信号的增强放大效应显示反应体系中抗原或抗体的性质与含量。在药物开发、科研项目过程中,常用的免疫检测方法有酶联免疫吸附实验 (ELISA)、流式细胞术(Fc)、免疫印记(WB)。

赛赋欣生依托抗体开发平台,可提供定制开ELLSA抗体、FC抗体、同型对照抗体、WB抗体,并针对应用场景标记不同荧光染料,偶联不同酶,达到检测目的。

酶联免疫吸附实验 (ELISA)高通量的免疫检测技术,使用抗体来结合并测定目的分子达到定性或定量检测的目的主要依赖抗体对分析物产生特异性,并且一部分(如辣根过氧化物酶 [HRP])直接或间接偶联抗体,从而提供检测方法并实现可能的信号放大。

直接 ELISA - 将信号放大作用的酶直接偶联在抗体上,检测目的抗原

间接 ELISA - 抗原的特异性抗体上不偶联酶,使用偶联的二抗来检测结合的抗体。

夹心 ELISA - 抗原被 2 种抗体识别,形成一种像三明治一样的复合体。首先包被一种抗体,用来捕获抗原,一种用来检测。检测可以是直接或间接的。

竞争性/抑制性 ELISA - 类似于直接 ELISA,但让抗体竞争性地或抑制抗体结合实测数量的抗原来进行定量。

ELISA 结果的准确性和精密度高度取决于抗体选择,因检测中使用的抗体,应评估其特异性、亲和力和亲合力,并应根据经验检测和优化。

抗体类型也谨慎选择。例如,对于夹心 ELISA, 必须使用针对不同表位产生抗体,才不会在彼此之间产生竞争。

流式细胞术(Fc)是细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞 ,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、 精度高、准确性好的优点,是当代最先进的细胞定量分析技术之一。

Fc成功的实验要求具有高度特异性和经验证的抗体以及可靠的荧光团。

同型对照是使用与一抗相同种属来源、相同亚型及亚链、相同荧光标记的免疫球蛋白,也要求使用相同剂量。如一抗是抗human CD3-FITC(mouse IgG1),同型对照则为Mouse IgG1-FITC.

Western Blot 即免疫印迹试验,通过特异性抗体凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。可以利用 Western Blot 来比较在不同条件下,不同细胞组织中目的蛋白表达量的差异,属于定性,半定量试验。

WB抗体要求非特异性强,抗原表位位线性表位最佳,抗体亲和力高,能够灵敏检测到微量凝胶蛋白。用于WB的抗体可以直接标记HRP酶或者使用标记相应物种的二抗进行实验。


我们的优势

Ø 真核表达平台,保证抗体的天然结构,表达稳定,批间差小

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Ø 成熟标记技术,满足不同检测方法的需求

Ø 技术过硬的研发团队,具有筛选多个抗体制备、筛选经验

 

 

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